關於NEPA21的常見問題解答

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Questions Answers
Q1 NEPA21可以用於（yú）細菌或酵母（mǔ）的電（diàn）轉化嗎? A1 不行，NEPA21是專用於動物細胞或植物（wù）原生質體轉染的（de），基於方波波形（xíng）而設計（jì），電壓控製精確（què）且電刺激溫和，有（yǒu）利（lì）於提高轉染效（xiào）率（lǜ）和細胞（bāo）存活率。轉化（huà）細菌和酵母適宜使用基於指數衰減波波形的電穿孔儀，或其它能產生高壓脈（mò）衝的裝置。
Q2 什（shí）麽是電穿孔脈衝（poring pulse）? A2 電穿孔脈衝是用於（yú）使細（xì）胞膜（mó）或核膜上產生小孔的脈衝電刺激，DNA或RNA等（děng）外源基因可以通過小孔（kǒng）進入到細（xì）胞內。這是用電穿孔法進行基因（yīn）導入的基本原理（lǐ），大部分品（pǐn）牌的電轉染儀都設計（jì）有這個步驟。NEPA21除可以產生電穿孔脈衝外，還具（jù）備很多新功能（néng），請參看Q3, Q4 和Q5
Q3 什麽是（shì）導入脈衝（transfer pulse）? A3 導（dǎo）入脈衝用於（yú）將帶負電的核酸分子（zǐ）通過"電泳效應"導入到細胞中，采用低壓和長脈衝時間的設計，充分利用"小孔修複"的這段時間，大大增加基因的轉染效率。這是NEPA GENE的專利技術。
Q4 為（wéi）什麽要進行基因的反向導入? A4 在體外轉（zhuǎn）染（in vitro）尤其是懸浮狀態下轉染（rǎn）時，雙向的（de）基因（yīn）導入模式，可以大大提高轉（zhuǎn）染效率；在（zài）活體（in vivo）轉染時，雙（shuāng）向導入模式，可以擴大轉染區域。這是NEPA GENE的專利技術。
Q5 為什麽設計多次脈衝? A5 多次脈衝可以提高穿孔（kǒng）效（xiào）率和導入效率，從而提高轉染率。由於NEPA21的多次脈衝是采用"電壓衰減"的方式進行的，不會給（gěi）細胞造（zào）成額外的損傷。這是NEPA GENE的專利技術，也是NEPA21獲得高轉染效率和高細胞存活率的重要原因之一。L
Q6 怎（zěn）樣（yàng）選擇in vivo, in ovo, ex vivo實驗（yàn）用的電極? A6 請將你需要做的實（shí）驗告訴我們，我們會為您推薦合（hé）適的電極和提供相關的文獻（reference）、實驗方案（protocol）供您參（cān）考。讓91成人版成為您的私人實驗顧問！
Q7 怎樣選擇（zé）合（hé）適的電轉杯耗材（cái）? A7 一般（bān）情況，我們推薦您使用2mm間隔的電轉杯，它（tā）適用的細胞數量範（fàn）圍最廣，也是最多研究者使用的（de）電轉杯型號。針對這個型號的電轉杯，我們可（kě）以提供的實驗方案（protocol）共享服務更多、準確性（xìng）更高（gāo）。
Q8 NEPA21與其它品牌的電轉杯（bēi）兼容嗎（ma）？或者，NEPA的電轉（zhuǎn）杯可以用於（yú）其它品牌的電轉染儀嗎？ A8 理論上隻要大小（xiǎo）合適（shì），電轉杯是通用的。但不同廠家使用（yòng）的（de）模具和材料有差異（yì），因此電轉杯的電阻會有差別。當您使用其他品牌的電轉杯來執行我們（men）為您建議的實（shí）驗方案（protocol）時，所（suǒ）取得的效果與使用NEPA GENE電轉杯的效果可能（néng）會有差別。同理，當您（nín）將NEPA GENE的電轉杯用（yòng）於其它品牌的儀器時，也需要對電轉染的參數進行優化調整。
Q9 NEPA21的轉染過程是否別（bié）的試劑輔助？ A9 不需要，電轉染（rǎn）時隻需使用您平時培養（yǎng）細（xì）胞用的基礎培（péi）養基（不含血清）。目（mù）前隻有NEPA21能做到這一點。
Q10 為什麽你們不將對（duì）應於不同細胞或組（zǔ）織的（de）轉染方案（protocol）在網頁中列出來？ A10 不同的細胞類型所（suǒ）適用的轉染程序不（bú）一（yī）樣，即使（shǐ）是（shì）名稱、來源相同的細胞，在不同實驗室的培養環境下，細胞膜對（duì）電刺激的反應亦可能不（bú）一致。因此，我們不建議死板的將protocol與cell type一（yī）一對應。我們會根據（jù）您（nín）的細胞的具體情況（kuàng），為您設計一套個性化的轉染方案（protocol）。多（duō）次實踐經驗告訴我們，如果僅在網頁上（shàng）給（gěi）不同細胞羅列一個"標準程序"，您（nín）在實際使用（yòng）中很可能（néng）得不到網頁上（shàng）所（suǒ）顯示的最佳轉染效果。
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